Descripción

El servicio permite el análisis de aspectos fisiológicos relacionados con procesos de interés en acuicultura (crecimiento, reproducción, estrés, metabolismo, osmorregulación, etc) en especies de alto valor comercial (dorada, lenguado, corvina, etc). De este modo se podrá realizar:

• Análisis de hormonas y de metabolitos en plasma.
• Análisis de metabolitos en tejidos.
• Análisis de actividades enzimáticas en tejidos.

Capacidades y Recursos

1. Preparación de muestras

Las muestras a analizar (plasma y tejidos) deberán estar preparadas de acuerdo a las características de las mismas y del parámetro a analizar (hormona, metabolito, actividad enzimática). Las muestras deberán aportarse en perfectas condiciones de preservación, existiendo la posibilidad de que las personas que prestan el servicio asesoren o recolecten ellos mismos las muestras.

2. Análisis de las muestras

• Análisis de hormonas en plasma. El análisis de hormonas esteroideas implicadas en procesos de estrés (cortisol) se realizará mediante técnicas de ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA).
• Analisis de metabolitos en plasma. La determinación de metabolitos (glucosa, proteínas, ácidos grasos, triglicéridos, aminoácidos, lactato) se realizará mediante técnicas espectrofotométricas.
• Análisis de metabolitos en tejidos (hígado, músculo, etc). La determinación de metabolitos (glucógeno, glucosa, proteínas, ácidos grasos, triglicéridos, aminoácidos, lactato) se realizará mediante técnicas espectrofotométricas en muestras de tejido debidamente procesadas.
• Análisis de actividades enzimáticas en tejidos (hígado, músculo, etc). Se podrán determinar actividades enzimáticas ligadas al metabolismo de carbohidratos, proteínas y lípidos. La determinación de estas actividades enzimáticas se realizará mediante técnicas espectrofotométircas en muestras de tejido debidamente procesadas.

En todos los análisis se utilizarán técnicas adaptadas a microplacas, empleando un lector de microplacas con su correspondiente longitud de onda de lectura y de referencia controlado por ordenador.

3. Análisis estadístico de datos

Dependiendo del diseño experimental aplicado se aplicarán técnicas univariantes o técnicas multivariantes, donde previamente se habrá determinado la homogeneidad de los datos.

Los resultados de los análisis de datos llevados a cabo se entregarán mediante un informe técnico en donde se aportarán los resultados de los test estadísticos de los datos, gráficos e interpretación de los resultados. Para la correcta interpretación de los mismos será necesario conocer datos referentes al proceso fisiológico estudiado, diseño experimental aplicado, condiciones abióticas del medio, etc.

El Laboratorio de Análisis Fisiológicos (LAF) se encuentra situado en el Centro Andaluz Superior de Estudios Marinos (CASEM), y se integra en el Departamento de Biología de la Facultad de Ciencias del Mar y Ambientales. Sus investigadores forman parte del Grupo de Excelencia del Plan Andaluz de Investigación RNM 216, página 152, (Patología e histofisiología de especies marinas).

Capacidades

El LAF cuenta con una dilatada experiencia en el estudio de aspectos fisiológicos relacionados con procesos de interés en acuicultura (crecimiento, estrés, metabolismo, osmorregulación, etc) en especies de alto valor comercial (dorada, lenguado, corvina, etc). Además presenta una amplia experiencia de cooperación con diversos agentes y empresas del sector acuícola (proyectos PETRI, contratos OTRI, etc). La mayoría de los trabajos de investigación realizados están publicados en revistas científicas internacionales de alto impacto, así como en Informes Científcos-Técnicos para diversos organismos y empresas del sector.

La instrumentación de la que dispone el grupo de investigación para el servicio ofertado es amplía y cubre todos los aspectos técnicos necesarios para la realización de los análisis ofertados. En esta instrumentación se incluye:

• Balanza granatario Blau Scal (Serie AH 600)
• Balanza precisión Gram (Serie SV 120 AS)
• Baño termostático P Selecta (Tectron 200) acoplado a una unidad refrigeradora externa P Selecta (Frigedor-Reg)
• Baño termostático con agitación orbital P Selecta (Unitronic-orbital C)
• Estufa de secado y esterilización P Selecta (Contero)
• Osmómetro Fiske (110 Osmometer)
• Arcón congelador -80°C (Forma Scientific, Bio-Freezer 8417) y dos frigoríficos
• Centrífuga refrigerada de alta capacidad Eppendorf (Centrifuge 5810 R)
• Equipo de homogenización Ultra Turrax T25 (IKA-Werke)
• Equipo sonicador Misonix inc (Microson Ultrasonic liquid processor XL-2000)
• Espectrofotómetro: Bio-Tek (PowerWave 340 Microplate spectrophotometer) y fluorímetro Bio-Tek (FLx800 Fluorescence Microplate reader) acoplados a equipo informático para el control de ambos equipos y el tratamiento de datos procedentes de los mismos
• Equipamiento de laboratorio básico para el procesamiento y análisis de muestras (micropipetas, microcentrífugas, agitadores, etc)

Otros Datos de Interés

El presente servicio técnico será llevado a cabo por investigadores del Laboratorio de Análisis Fisiológicos de la Facultad de Ciencias del Mar y Ambientales (Universidad de Cádiz), supervisado por el Catedrático de Universidad Dr. Juan Miguel Mancera Romero.

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